*步、先將培養(yǎng)操作室形成厭氧環(huán)境：

1、按使用要求在培養(yǎng)操作室內(nèi)放置除氧催化器及已封閉的培養(yǎng)皿等。500g鈀粒除氧劑（密封狀態(tài)）和500克干燥劑。

2、按下電源開關(guān)，關(guān)緊取樣室內(nèi)、外門，按下真空泵按鈕將取樣室抽成負壓（見真空表指針指向

0.06MPa）。

3、要將培養(yǎng)操作室內(nèi)的氧氣含量達到極微量狀態(tài)，須經(jīng)三次氣體置換：（1）*次氣體置換，

純度為99.99％的氮氣。操作如下：

    把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊。按下箱內(nèi)氮氣進開關(guān)，氮氣即達到充足狀態(tài)，再按動此開關(guān)，即關(guān)閉。雙手伸入乳膠手套，并隨即踏腳踏開關(guān)，氮氣即會漸漸充入培養(yǎng)室。（2）第二次氣體置換（氮氣置換），重復(fù)一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。（3）第三次置換混合氣體，混合氣體配比為：N2↑90%、H2↑5%、CO2↑5%，純度均為99.99％。先將取樣室抽真空，至真空表指針指向0.06MPa。按下箱內(nèi)混合氣進開關(guān)，混合氣體達到充足狀態(tài)，再按動此開關(guān)，即關(guān)閉。按下箱內(nèi)混合氣微調(diào)開關(guān)，使混合氣體按一定的流量充入培養(yǎng)室。通過三次換氣后，培養(yǎng)操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

4、培養(yǎng)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧。

5、用戶使用前或使用后如需操作培養(yǎng)室、取樣室滅菌，可打開內(nèi)置培養(yǎng)箱外門即取樣室內(nèi)門，后開啟控制面板殺菌開關(guān)，可將操作室等進行滅菌處理。時間長短可根據(jù)用戶實際需要自定。操作該功能注意事項詳見系統(tǒng)化“注意事項”第（7）條。

第二步、將菌種置入和培養(yǎng)

1、檢查取樣室內(nèi)門并將它關(guān)緊。

2、打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。

3、完成取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空至0.06MPa以上停，然后人工打開過道氮氣進開關(guān)，當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道氮氣進開關(guān)。重復(fù)以上操作進行第二次氮氣置換。第三次氣體置換操作時，抽真空度0.06MPa以上停，然后打開過道混合氣進開關(guān)充進混合氣體，當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道混合氣進開關(guān)。取樣室充氣置換三次過程結(jié)束。

4、為保證培養(yǎng)操作室厭氧環(huán)境不被破壞，選取較低真空度進行充氮置換時應(yīng)增加置換次數(shù)。

5、開啟取樣室內(nèi)門，將菌種從取樣室移入培養(yǎng)操作室，再將取樣室內(nèi)門關(guān)緊，再抽真空檢

查內(nèi)門是否關(guān)緊。

6、如培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用，則必須：（1）每天在培養(yǎng)操作室內(nèi)觀察，如發(fā)現(xiàn)不正常就必須更換氣體。（2）如用戶在操作時，由于產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的原因，在停止供氣12小時以后，有可能存在極微量的滲漏，或培養(yǎng)所需菌種需求要求微量混合氣體的補充時，可經(jīng)內(nèi)置過濾器連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧氣結(jié)合并被催化吸收，保證箱內(nèi)厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量為每分鐘10ml左右。（3）連續(xù)培養(yǎng)一天，更換一次除氧劑和干燥劑。

7、培養(yǎng)操作室內(nèi)溫度可在溫控范圍內(nèi)任意選擇和控制。

8、混合氣瓶，氮氣瓶輸出壓力調(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力為0.02Mpa左右。

注意事項及產(chǎn)品維護和保養(yǎng)：

1、儀器盡可能安裝在空氣清潔，溫度變化較小的地方。

2、開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明書，掌握正確使用方法。

3、培養(yǎng)物必須在培養(yǎng)操作室達到無氧環(huán)境后放入。

4、如發(fā)生故障（停氣等原因）培養(yǎng)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。（超過12小則需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。

5、經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

6、當(dāng)氣瓶氣體用盡，總輸出壓力小于0.1Mpa時，應(yīng)盡快調(diào)換氣瓶，調(diào)換氣瓶時注意要扎緊氣管，避免管內(nèi)流入含氧氣體。

7、殺菌燈如需開啟時，由于殺菌燈管能輻射出強烈的2537Å短波紫外線，對核酸蛋白質(zhì)作用特別強。能使細菌發(fā)生變異殺死，同時，紫外線對有機細胞具有殺傷力。人的眼睛和皮膚較長時間暴露在紫外線下會造成灼傷。所以，必須開啟時應(yīng)拿出操作室或培養(yǎng)室中的培養(yǎng)物。開啟后應(yīng)及時離開紫外線輻射之外，以免造成人體不舒，如頭痛、胸悶、暈眩等現(xiàn)象。

8、整機無電，可檢查電源插入端有無220V電源插入，如有電源可拔下插頭，檢查控制面板上熔斷器是否熔斷。如屬熔斷需有電工或電器知識的人員調(diào)換或檢修，也可垂詢生產(chǎn)廠家，請勿自行調(diào)換，以免可能發(fā)生意外和造成不需要的損失。

9、在初設(shè)氣體置換或培養(yǎng)結(jié)束釋放混合氣體時，應(yīng)打開實驗室門窗或?qū)⑼L(fēng)口打開，以加速氣體的流通。減少釋放氣體超標(biāo)吸入人體而引起不適。